������������������ abstrak jumlah layanan air minum melalui depot air minum di kota kupang meningkat dengan rata-rata 1,44 setiap tahun sejak 2010, sementara tidak terdapat jaminan kualitas air minum isi ulang memenuhi syarat setiap saat. hasil pemeriksaan sampel air minum isi ulang di kota kupang tahun 2013 menunjukkan 37,5% tercemar mikroba. tujuan penelitian ini adalah meng- analisis cemaran mikroba dan mengetahui determinan cemaran escherichia coli ( e. coli ) dan total koliform pada air minum isi ulang. penelitian ini menggunakan desain studi potong lintang periode januari – maret 2015. populasi penelitian berjumlah 51 depot air minum yang diten- tukan menggunakan teknik total sampling . analisis data dilakukan secara univariat, analisis bivariat menggunakan uji regresi logistik sederhana, dan analisis multivariat menggunakan regresi logistik berganda. hasil penelitian terhadap 51 depot air minum menunjukkan air minum telah tercemar mikro- ba sebanyak 26 depot air minum (51%), tercemar e. coli 33,33%, dan ter- cemar total koliform 51%. deteminan cemaran mikroba dengan uji bivariat adalah pengetahuan (nilai p = 0,01), sikap operator (nilai p = 0,05). sedangkan determinan cemaran mikroba uji multivariat adalah penge- tahuan operator (nilai p = 0,026), kebersihan operator (nilai p = 0,05) dan sanitasi depot air minum (nilai p = 0,044). variabel yang paling dominan memengaruhi cemaran mikroba adalah pengetahuan, kebersihan operator, dan sanitasi depot air minum. kata kunci : air minum isi ulang, depot air minum, escherichia coli, total ko- liform